Abstract MDR Klebsiella pneumoniae ST307 is a high-risk clone, whose genetic features contribute to its adaptation to hospital environments and the human host. This study describesthe emergence and clonal dissemination of K. pneumoniae ST307, recovered during November2018 to February 2019 in a hospital in Buenos Aires city, which concurrently harbored KPC-3and NDM-1. These isolates were resistant to all -lactams and to the ceftazidime/avibactamcombination. Molecular studies showed that blaKPC-3was located in Tn4401a platform, whileblaNDM-1was surrounded upstream by ISKpn14 followed by a partial sequence of ISAba125 anddownstream by bleMBL-trpF, located in a 145.5 kb conjugative plasmid belonging to the Inc A/Cgroup. The dissemination of K. pneumoniae ST307 isolates co-producing KPC-3 and NDM-1 couldlead to a worrisome scenario due to the remarkable features of this clone and its resistanceprofile.

Resumen Klebsiella pneumoniae ST307 es un clon de alto riesgo, cuyas características genéticas contribuyen a su adaptación al entorno hospitalario y al huésped humano. Este estudio describe la emergencia y diseminación clonal de aislamientos de K. pneumoniae ST307 productores de KPC-3 y NDM-1, recuperados en un hospital de Buenos Aires. Estos aislamientos fueron resistentes a todos los p-lactámicos y a la combinación ceftacidima/avibactam. Los estudios moleculares evidenciaron que el contexto genético de blaKPC-3 se correspondió con el Tn4401a, mientras que blaNDM-1 estuvo flanqueado corriente arriba por ISKpn14 y una secuencia parcial de ISAba125 y corriente abajo por bleMBL - trpF, localizado a su vez en un plásmido conjugativo de 145.5 kb perteneciente al grupo Inc A/C. La emergencia de aislamientos de K. pneumoniae ST307 coproductores de KPC-3 y NDM-1 pone de manifiesto una situación altamente preocupante debido a las características de este clon y a su perfil de multirresistencia.

Resumen Achromobacter spp. son reconocidas con mayor frecuencia como patógenos emergentes en pacientes con fibrosis quística e inmunodeprimidos, pero son inusuales en hospedadores inmunocompetentes o quirúrgicos. En este estudio describimos 2 eventos simultáneos atribuibles a 2 fuentes contaminadas con Achromobacter spp. Uno correspondió a un episodio de seudobacteriemia por tubos de citrato de sodio contaminados con Achromobacter insuavis y el otro a infecciones y colonizaciones debidas al uso de solución jabonosa de clorhexidina intrínsecamente contaminada con Achromobacter genogrupo 20. Ambos episodios pusieron en peligro el uso apropiado de antimicrobianos. Los enfoques moleculares fueron fundamentales para lograr la identificación precisa de las especies y evaluar la relación clonal de los aislamientos, lo que refuerza la necesidad del trabajo perseverante y multidisciplinario de microbiólogos, especialistas en enfermedades infecciosas, epidemiólogos y enfermeras en el control de infecciones para el esclarecimiento de estas situaciones epidemiológicas.

Abstract Achromobacter spp. are increasingly recognized as emerging pathogens in immunocompromised patients or suffering cystic fibrosis, but unusual in immunocompetent hosts or individuals that underwent surgery. In this study we describe two simultaneous events attributable to two different Achromobacter spp. contaminated sources. One event was related to an episode of pseudo-bacteremia due to sodium citrate blood collection tubes contaminated with Achromobacter insuavis and the other to Achromobacter genogroup 20 infection and colonization caused by an intrinsically contaminated chlorhexidine soap solution. Both threatened the appropriate use of antimicrobials. Molecular approaches were critical to achieving the accurate species identification and to assess the clonal relationship, strengthening the need for dedicated, multidisciplinary and collaborative work of microbiologists, specialists in infectious diseases, epidemiologists and nurses in the control of infections to clarify these epidemiological situations.

Resumen Durante la última década, Achromobacter spp. han sido asociadas con la colonización crónica en pacientes con fibrosis quística. Si bien Achromobacter xylosoxidans es la especie más frecuentemente recuperada, otras especies como Achromobacter ruhlandii también fueron reportadas en nuestra región. Sin embargo, pocos reportes se han centrado en la descripción de elementos móviles, y ninguno de ellos los documenta en A. ruhlandii. El objetivo de este estudio fue reportar la caracterización completa de un plásmido conservado en 4 aislamientos clonalmente relacionados de A. ruhlandii. Se recuperaron 9 aislamientos de A. ruhlandii entre 2013 y 2015 de un único paciente con fibrosis quística proveniente de un hospital pediátrico de Buenos Aires, Argentina. Se realizó la secuenciación completa del genoma de los 4 aislamientos seleccionados según el perfil de resistencia antibiótica en un equipo Illumina MiSeq. Estos fueron anotados mediante RAST y curados manualmente. Se detectó la presencia de un solo plásmido de 34.096 pb y 50CDS en los 4 aislamientos, observándose únicamente un cambio nucleotídico traducido en un cambio aminoacídico en un aislamiento. Los plásmidos ensamblados se caracterizaron por presentar un integrón de clase 1 que contenía el gen aac-(6')-Ib, un operón de resistencia a mercurio y el sistema de toxina-antitoxina relE/stbE. Cabe destacar que estos plásmidos poseen un 79% de similitud y un 99% de identidad con el plásmido pmatvim-7 de Pseudomonas aeruginosa. Esta es la primera descripción y caracterización completa de un plásmido proveniente de A. ruhlandii.

Abstract In the last decade Achromobacter spp. has been associated with chronic colonizationin patients with cystic fibrosis (CF). Although Achromobacter xylosoxidans is the most frequentspecies recovered within this genus, other species such as A. ruhlandii have also been reportedin these patients. Descriptions of mobile elements are scarce in Achromobacter and none ofthem have been originated in A. ruhlandii. The aim of this study was to report the full char-acterization of a plasmid which was maintained in four clonally related A. ruhlandii isolates.Between 2013 and 2015, nine A. ruhlandii isolates were recovered from a pediatric patientwith CF at a hospital in Buenos Aires. Four selected clonally related isolates were sequencedby Illumina MiSeq, annotated using RAST and manually curated. The presence of a unique plas-mid of 34096-bp and 50 CDS was observed in the four isolates, displaying only 1 nucleotidesubstitution translated into one amino acid change among them. These plasmids have a class 1integron containing the aac-(6)-Ib gene, a mercury resistance operon region and the relE/stbEtoxin/antitoxin system. Plasmids showed 79% similarity and 99% identity with pmatvim-7 fromPseudomonas aeruginosa. This is the first full description and characterization of a plasmid fromA. ruhlandii which was maintained over time.

RESUMEN El presente estudio tuvo como objetivo establecer los perfiles de ácidos grasos de una variedad de alimentos tradicionales que se consumen regularmente en Paraguay. Se evaluaron treinta y dos alimentos con alto contenido de lípidos mediante cromatografía de gases acoplada a detector de ionización de llama (GC-FID). Los productos cárnicos y lácteos presentaron un elevado nivel de ácidos grasos saturados, aumentando los índices de aterogenicidad y trombogenicidad. Entre los monoinsaturados, el ácido oleico (18: 1n-9c) se encuentró principalmente en aceitunas (71,7%) y chipa (62,7%), este último preparado industrialmente por adición de ácido oleico. En cuanto al contenido de ácidos grasos trans, los valores más altos se encontraron en los helados a base de leche (5,1%) y chipa guazú (3,8%). Los valores de la relación n-6 / n-3 fueron superiores a 37:1 en sopa paraguaya y empanada (frita) debido a la adición de aceite de soja y maíz utilizado en la preparación de alimentos. Los datos evaluados y presentados en este estudio pueden contribuir a la mejora de los hábitos alimentarios de la población paraguaya, así como ayudar a combatir los factores de riesgo comúnmente asociados con los malos hábitos alimentarios y los problemas crónicos de salud.

ABSTRACT The present study aims to establish the fatty acid profile of a variety of traditional foods consumed regularly in Paraguay. Thirty-two high-lipid content foods were evaluated by gas chromatography coupled with a flame ionization detector (GC-FID). Meat and dairy products were found to present high levels of saturated fatty acids, and this led to an increase in the atherogenicity and thrombogenicity indices of these products. Among the monounsaturated acids evaluated, oleic acid (18:1n-9c) was mainly found in olives (71.7%) and chipa (62.7%), which had been industrially prepared with the addition of oleic acid. Milk-based ice cream (5.1%) and chipa guazú (3.8%) presented the highest content of trans fatty acids. The n-6/n-3 fatty acids ratio obtained for the traditional sopa Paraguaya and empanada (fried pasty) was higher than 37:1; this can be attributed to the addition of soybean and corn oils in the preparation of these foods. The data evaluated and presented in this study can contribute toward the improvement of eating habits among the Paraguayan population, as well as help combat the risk factors commonly associated with bad eating habits and chronic health issues.

Abstract Metallo-p-lactamases (MBL) producing Pseudomonas aeruginosa isolates have been well characterized. Quinolones are commonly used in the treatment of carbapenem-resistant P. aeruginosa infections; however, data about PMQR in this species are scarce. The objective of this study was to report the simultaneous presence of qnrS and blaV|M-n in P. aeruginosa, and to characterize the qnrS-harboring plasmid. Thirty-eight carbapenem-resistant P. aeruginosa isolates were recovered from a hospital in Buenos Aires during 2012. Screening forMBL was assessed by the double disk synergy test using EDTA and carbapenem discs. Plasmid DNA extraction was performed by a method using phenol-chloroform. PCR followed by sequencing was carried out to determine each MBL and PMQR allele. PCR-BseGI-RFLP was performed to detect aac-(6')-Ib-cr. The gyrA-QRDR was sequenced in those PMQR-harboring isolates. Plasmid incompatibility groups and addiction systems were characterized by PCR. The PMQR-carrying plasmid was sequenced using Illumina technology, annotated using RAST and manually curated. Eleven/38 isolates were VIM producers (blaVIM-2 and blaVIM-11) while 1/38 harbored blaIMP-13. One isolate harbored blaVIM-11 and the PMQR qnrSI; however, both markers were located in different plasmids. The qnrSí-harboring plasmid (pP6qnrS1) was 117 945 bp in size, presented 154 CDS and corresponded to the IncR group. In addition to qnrSI, it harbored several aminoglycoside resis-tance markers. Although pP6qnrS1 was non-conjugative, it presented an oriT which made it possible for this plasmid to be transferable. This is the first report on P. aeruginosa carrying both blaVIM-11 and qnrSI, plus the first detection of an IncR plasmid in Argentina.

Resumen Las quinolonas son comúnmente utilizadas en el tratamiento de las infecciones producidas por Pseudomonas aeruginosa resistentes a carbapenems (PARC); aun así, la información sobre la resistencia a quinolonas mediada por plásmidos (PMQR) en esta especie es escasa. El objetivo de este trabajo fue reportar la presencia simultánea de los genes qnrS y blaVIM-11 en PARC y caracterizar el plásmido portador de qnrS. Durante 2012 se recuperaron 38 PARC en un hospital de Buenos Aires. El tamizaje para detectar producción de metalo-beta-lactamasas (MBL) se llevó a cabo mediante sinergia de doble disco utilizando EDTA y carbapenems. El ADN plasmídico fue extraído utilizando fenolcloroformo. Para determinar los alelos de los genes implicados en la síntesis de MBL y de PMQR, se llevó a cabo PCR-secuenciación. Para la detección de aac-(6')-Ib-cr se realizó PCR-BseGI-RFLP. En aquellos aislamientos portadores de PMQR se secuenció el gen gyrA. Los grupos de incompatibilidad y sistemas de adicción fueron caracterizados por PCR. El plásmido portador de PMQR fue secuenciado completamente y curado manualmente. De 38 aislamientos, 11 fueron productores de VIM (blaVIM-2 y blaVIM-11), mientras que uno contenía blaIMP-13. Si bien un aislamiento fue portador de blaVIM-11 y de qnrSI, dichos marcadores se encontraban en distintos plásmidos. El plásmido portador de qnrSI (pP6qnrS1) presentó un tamaño de 117.945 pby 154 secuencias codificantes (CDS); este correspondió al grupo de incompatibilidad IncR. Además de qnrSI, el plásmido portaba diversos marcadores de resistencia a aminoglucósidos. Aun cuando pP6qnrS1 no resultó conjugativo, presentó un oriT, de modo que posiblemente sea transferible. Este es el primer informe acerca de PARC portadora de blaVIM-11 y de qnrSI en simultáneo, además, es la primera descripción de un plásmido IncR en Argentina.

Abstract Different phenotype-based techniques and molecular tools were used to describe the distribution of different Achromobacter species in patients with cystic fibrosis (CF) in Argentina, and to evaluate their antibiotic resistance profile. Phenotypic identification was performed by conventional biochemical tests, commercial galleries and MALDI-TOF MS. Genetic approaches included the detection of A. xylosoxidans specific marker blaoxa-114, the amplificaron and sequencing of the 16S rRNA gene, nrdA and blaOXA complete sequence, and MLST analysis. Phenotypic approaches, even MALDI-TOF, rendered inconclusive or misleading results. On the contrary, concordant results were achieved with the nrdA sequencing or sequence type (ST) analysis, and the complete blaOXA sequencing, allowing a reliable discrimination of different Achromobacter species. A. xylosoxidans accounted for 63% of Achromobacter infections and A. ruhlandii accounted for 17%. The remaining species corresponded to A. insuavis, A. dolens, A. marplatensis and A. pulmonis. Antimicrobial susceptibilities were determined by the agar dilution method according to CLSI guidelines. Piperacillin, piperacillin/tazobactam and car-bapenems were the most active antibiotics. However, the emergence of carbapenem-resistant isolates was detected. In conclusion, prompt and accurate identification tools were necessary to determine that different Achromobacter species may colonize/infect the airways of patients with CF. Moreover, antimicrobial therapy should be administered based on the susceptibility profile of individual Achromobacter sp. isolates. © 2019 Asociación Argentina de Microbiología. Published by Elsevier España, S.L.U. This is an open access article under the CC BY-NC-ND license (https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).

Resumen Se emplearon diversas técnicas fenotípicas y moleculares para describir la distribución de diferentes especies del género Achromobacter en pacientes con fibrosis quística (FQ) en Argentina, y se evaluó el perfil de resistencia a los antibióticos. Se realizó la identificación fenotípica por pruebas bioquímicas convencionales, galerías comerciales y MALDI-TOF MS. El enfoque genético incluyó la detección del marcador especie-específico de A. xylosoxidans bla[PRESERVECIRC]tu, la amplificación y la secuenciación de los genes ARNr 16S, nrdA y secuencia completa de blaOXA, y el análisis por MLST. Los enfoques fenotípicos, incluso la técnica de MALDI-TOF, proporcionaron resultados no concluyentes o erróneos. Por el contrario, se obtuvieron resultados concordantes entre la secuenciación del gen nrdA o el análisis de secuenciotipos (ST) y la secuenciación completa de blaOXA, lo que permitió una discriminación confiable de las diferentes especies de Achromobacter. A. xylosoxidans representó el 63% de las infecciones por Achromobacter y A. ruhlandii representó el 17%. Las especies restantes correspondieron a A. insuavis, A. dolens, A. marplatensis y A. pulmonis. Se determinó la sensibilidad a antimicrobianos por el método de dilución en agar de acuerdo al CLSI. Los antibióticos más activos fueron piperacilina, piperacilina/tazobactam y carbapenemes. Sin embargo, se detectó la emergencia de aislamientos resistentes a carbapenemes. En conclusión, resultaron necesarias herramientas de identificación rápida y precisas para determinar las diferentes especies del género Achro-mobacter capaces de colonizar/infectar las vías respiratorias de los pacientes con FQ. Asimismo, la terapia antimicrobiana debería llevarse a cabo en función del perfil de sensibilidad de los aislamientos individuales de Achromobacter spp. © 2019 Asociacion Argentina de Microbiología. Publicado por Elsevier Espana, S.L.U. Este es un artículo Open Access bajo la licencia CC BY-NC-ND (https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).

A molecular survey was conducted in Cochabamba, Bolivia, to characterize the mechanism involved in the resistance to clinically relevant antibiotics. Extended Spectrum β-lactamase encoding genes and plasmid-mediated quinolone resistance (PMQR) markers were investigated in a total of 101 oxyimino-cephalosporin-resistant enterobacteria recovered from different health centers during four months (2012-2013). CTX-M enzymes were detected in all isolates, being the CTX-M-1 group the most prevalent (88.1%). The presence of blaOXA-1 was detected in 76.4% of these isolates. A high quinolone resistance rate was observed among the included isolates. The aac(6′)-Ib-cr gene was the most frequent PMQR identified (83.0%). Furthermore, 6 isolates harbored the qnrB gene. Interestingly, qepA1 (6) and oqxAB (1), were detected in 7 Escherichia coli, being the latter the first to be reported in Bolivia. This study constitutes the first molecular survey on resistance markers in clinical enterobacterial isolates in Cochabamba, Bolivia, contributing to the regional knowledge of the epidemiological situation. The molecular epidemiology observed herein resembles the scene reported in South America.

Se llevó a cabo un relevamiento molecular de la resistencia a antibióticos de importancia clínica en aislamientos recuperados en Cochabamba, Bolivia. Se estudiaron los genes codificantes de β-lactamasas de espectro extendido y de resistencia a quinolonas de localización plasmídica (PMQR) en un total de 101 aislamientos de enterobacterias resistentes a oximinocefalosporinas recuperados en distintos centros de salud, durante 4 meses (2012-2013). En todos ellos se detectó la presencia de cefotaximasas, las CTX-M grupo 1 fueron las más prevalentes (88,1%). La presencia de blaOXA-1 se detectó en el 76,4% de estos aislamientos. Se observó una elevada proporción de aislamientos resistentes a quinolonas. El gen aac(6′)-Ib-cr fue el determinante PMQR más frecuentemente identificado (83%). Además, 6 aislamientos resultaron ser portadores de qnrB. Por otro lado, cabe remarcar que 7 Escherichia coli presentaron qepA1 (6) y oqxAB (1); se documenta así por primera vez la presencia de oqxAB en Bolivia. Este estudio constituye el primer relevamiento de marcadores de resistencia en aislamientos clínicos de enterobacterias en Cochabamba, Bolivia; de este modo se contribuye al conocimiento regional de la situación epidemiológica, la cual presenta un escenario similar al observado en el resto de Latinoamérica.

Salmonella enterica serovar Heidelberg ranks among the most prevalent causes of human salmonellosis in the United States and Canada, although it has been infrequently reported in South American and European countries. Most Salmonella infections are self-limiting; however, some invasive infections require antimicrobial therapy. In this work we characterized an oxyimino-cephalosporin resistant S. Heidelberg isolate recovered from an inpatient in a Buenos Aires hospital. CMY-2 was responsible for the β-lactam resistance profile. S. Heidelberg contained a 97 kb plasmid belonging to the Inc N group harboring blaCMY-2. ISEcp1 was located upstream blaCMY-2 driving its expression and mobilization. The isolate belonged to sequence type 15 and virotyping revealed the presence of sopE gene. In this study we identified the first CMY-2 producing isolate of S. Heidelberg in Argentina and even in South America.

Salmonella enterica serovar Heidelberg es uno de los principales agentes causantes de salmonelosis en humanos en Estados Unidos y Canadá, sin embargo, resulta infrecuente en los países de Sudamérica y Europa. En este trabajo se caracterizó un aislamiento de S. Heidelberg resistente a oximino-cefalosporinas recuperado de un paciente internado en un hospital de la Ciudad de Buenos Aires. Se evidenció la presencia de un plásmido de 97 kb perteneciente al grupo de incompatibilidad IncN, portador del gen blaCMY-2. ISEcp1 fue localizado corriente arriba de blaCMY-2, promoviendo su expresión y movilización. El aislamiento de S. Heidelberg correspondió al secuenciotipo 15 y en la virotipificación se detectó el gen sopE. En este trabajo describimos por primera vez la producción de CMY-2 en una cepa de S. Heidelberg en nuestro país y América Latina.

High quinolone resistance rates were observed among oxyiminocephalosporin-resistant enterobacteria. In the present study, we searched for the prevalence of plasmid-mediated quinolone resistance (PMQR) genes within the 55 oxyiminocephalosporin-resistant enterobacteria collected in a previous survey. The main PMQR determinants were aac(6')-Ib-cr and qnrB, which had prevalence rates of 42.4% and 33.3%, respectively. The aac(6')-Ib-crgene was more frequently found in CTX-M-15-producing isolates, while qnrB was homogeneously distributed among all CTX-M producers.

CMY-2 ß-lactamase is an important cause of ß-lactam resistance in Enterobacteriaceae and constitutes the most widespread pAmpC. Although CMY-2 has been previously recognized in our region, the real prevalence and epidemiology of this resistance marker was uncertain. During August-October 2009, we conducted a multicenter, prospective study to determine pAmpC prevalence and to characterize CMY-2 producing Escherichia coli associated plasmids. Plasmid-encoded AmpC prevalence was 0.9 % in enterobacteria in this period, being CMY- 2 prevalent and to a lesser extent DHA. Molecular typing of CMY-2- producing Escherichia coli isolates showed several lineages. Moreover, replicon typing of cmy-2- containing plasmids displayed a broad diversity in Inc/cmy- 2 links. Therefore, association of cmy-2 with specific transposon elements may be responsible for the spread of this resistance marker in Enterobacteriaceae.

La ß-lactamasa de tipo AmpC de codificación plasmídica CMY-2 es la de mayor diseminación a nivel mundial en Enterobacteriaceae. Esta ha sido comunicada esporádicamente en nuestro país. Entre agosto y octubre de 2009 se llevó a cabo un estudio prospectivo y multicéntrico con el objetivo de determinar la prevalencia de pAmpC en nuestro medio y de caracterizar a los microorganismos productores y a los plásmidos portadores de estos marcadores de resistencia. La prevalencia de pAmpC plasmídicas en enterobacterias en este período fue de 0,9 %. La ß-lactamasa CMY-2 fue la enzima prevalente y, en menor medida, la DHA. La tipificación molecular de los aislamientos de Escherichia coli productores de CMY-2 mostró la presencia de distintos linajes, y los plásmidos portadores de cmy-2 pertenecieron a una amplia diversidad de grupos de incompatibilidad. Se determinó la asociación corriente arriba de cmy-2 con ISEcp1, el cual podría ser responsable de la amplia diseminación de este marcador de resistencia en Enterobacteriaceae.

OBJECTIVE: To identify the outer membrane protein absent in the resistant isolates and to determine both the causes of its absence in the membrane and the presence of other mechanisms of carbapenem resistance in clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa. METHODS: Twenty isolates from an outbreak of P. aeruginosa previously characterized as metallo-beta-lactamase IMP-13 producers were studied. All the isolates exhibited equal expression of the IMP-13 enzyme, but only five of them were carbapenem-resistant. It was found that the five resistant isolates lacked a outer membrane protein. The oprD and ampC genes were sequenced; the outer membrane proteins were identified using matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight (MALDI-TOF) mass spectrometry; the OprD and AmpC expressions, as well as the Mex efflux system, were assessed by real-time polymerase chain reaction; and finally, the contribution of reduced OprD to carbapenem resistance was determined. RESULTS: The absent outer membrane protein in group R was identified as OprD-TS; however, no variations in its expression were observed. The oprD gene presented mutations in the five resistant isolates. The production of AmpC PDC-5-type enzyme and the MexAB-OprM efflux system was the same in both carbapenem-sensitive and ‑resistant isolates. The contribution of the combined presence of IMP-13 and reduced OprD to increased resistance was examined. CONCLUSIONS: Different mechanisms contribute to carbapenem resistance in IMP-13-producing isolates. The possibility that these IMP-13-producing isolates could go undetected poses a latent risk when selecting mutants with added resistance mechanisms in order to enhance carbapenem resistance.

OBJETIVO: Identificar la proteína de membrana externa ausente en los aislamientos resistentes y determinar tanto las causas de su ausencia en la membrana, como la presencia de otros mecanismos de resistencia a carbapenemes en aislamientos clínicos de Pseudomonas aeruginosa. MÉTODOS: Se estudió un brote de 20 aislamientos de P. aeruginosa previamente caracterizados como productores de la metalobetalactamasa IMP-13. Estos aislamientos presentaron igual expresión de la enzima IMP-13, pero solo cinco de ellos fueron resistentes a carbapenemes. En esos cinco aislamientos resistentes se confirmó la ausencia de una proteína de membrana externa. Se secuenciaron oprD y ampC; se identificaron las proteínas de membrana externa por desorción/ionización láser asistida por matriz/espectometría de masa tiempo de vuelo (MALDI-TOF); se determinó el nivel de expresión de oprD, de AmpC y de los sistemas de eflujo tipo Mex, por reacción en cadena de polimerasa en tiempo real, y por último, se determinó la contribución del déficit de oprD a la resistencia a carbapenemes. RESULTADOS: La proteína de la membrana externa ausente en el grupo R (resistentes a ambos carbapenemes) fue identificada como OprD-TS, pero no se observaron variaciones en su expresión. El gen oprD presentó mutaciones en los cinco aislamientos resistentes. Se observó la misma producción de la enzima tipo AmpC PDC-5 y del sistema de eflujo Mex AB-OprM entre los aislamientos sensibles y resistentes a carbapenemes. Se analizó cómo la presencia conjunta de IMP-13 y el déficit de oprD contribuyen al aumento de la resistencia. CONCLUSIONES: Distintos mecanismos contribuyen a la resistencia de aislamientos productores de IMP-13 a carbapenemes. La posibilidad de no detectar estos aislamientos productores de IMP-13 representa un riesgo latente de selección de mutantes con mecanismos de resistencia que se suman para aumentar la resistencia a carbapenemes.

This document contains the recommendations for antimicrobial susceptibility testing of the clinically relevant non-fermenting gram-negative bacilli (NFGNB), adopted after conforming those from international committees to the experience of the Antimicrobial Agents Subcommittee members and invited experts. This document includes an update on NFGNB classification and description, as well as some specific descriptions regarding natural or frequent antimicrobial resistance and a brief account of associated resistance mechanisms. These recommendations not only suggest the antimicrobial drugs to be evaluated in each case, but also provide an optimization of the disk diffusion layout and a selection of results to be reported. Finally, this document also includes a summary of the different methodological approaches that may be used for detection and confirmation of emerging b-lactamases, such as class A and B carbapenemases.

En este documento se dan a conocer una serie de recomendaciones para el ensayo, la lectura, la interpretación y el informe de las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos para los bacilos gram negativos no fermentadores (BGNNF) que se aíslan en humanos. Se adoptaron como base las recomendaciones internacionales, las de la Subcomisión de Antimicrobianos de la Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínicas y las de un grupo de expertos invitados. Se incluye, además, la nomenclatura actualizada de los BGNNF y la descripción de algunas de sus características individuales, de sus resistencias naturales o habituales a los antimicrobianos de uso clínico y de los mecanismos responsables de tales resistencias. También se indican los agentes antimicrobianos que se deberían ensayar frente a las distintas especies, con la especificación de cuáles deberían ser informados, y su ubicación estratégica en las placas de cultivo para poder detectar los mecanismos de resistencia más frecuentes y relevantes. Por último, se detallan los métodos de detección y de confirmación fenotípica de la presencia de b-lactamasas emergentes en Argentina, como las carbapenemasas clases A y B.